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印跡膜有什么特點

標簽：轉(zhuǎn)印膜

生物印跡技術(shù)是將待測生物大分子結(jié)合到一定固相支持物（微濾膜）上的方法。主要印跡技術(shù)有Northern印跡、Southern印跡。生物印跡技術(shù)中的印跡膜是專門用于分離和檢測生物分子（如蛋白質(zhì)、核酸、細胞等）的材料。

目錄

1、Northern印跡、Southern印跡、Western印跡區(qū)別對比

2、印跡膜特性

印跡膜作為印跡技術(shù)中的重要固相支持物的主要特性
NC印跡膜、尼龍印跡膜和PVDF印跡膜的區(qū)別

3、印跡膜性能驗證

4、邁博瑞印跡膜參數(shù)

一、Northern印跡、Southern印跡、Western印跡區(qū)別對比

	Southern blot	Northern blot	Western blot
定義	用于識別特定DNA序列的程序	Southern blot的改編，通過與互補DNA的雜交來檢測特定RNA序列	用于鑒定蛋白質(zhì)中特定氨基酸序列的印跡程序
開發(fā)者	1975年，愛德華	1977年，詹姆斯.阿爾溫等人	1979年，喬治.斯塔克
檢測到的分子類型	特異性DNA序列	特異性RNA序列	特定蛋白質(zhì)
電泳	瓊脂糖凝膠電泳	甲醛瓊脂糖凝膠電泳	SDS PAGE/聚丙烯酰胺凝膠
印跡程序	毛細管轉(zhuǎn)移	毛細管轉(zhuǎn)移	電動傳輸
探針	DNA探針	cDNA探針	一抗和二抗
樣本制備	變性處理	自然狀態(tài)	自然狀態(tài)
應用	檢測給定樣品中特定DNA序列親子鑒定、DNA指紋圖譜受害者識別、識別犯罪遺傳疾病和傳染因子檢測基因重排突變和鑒定	識別給定樣品中特定RNA序列有助于疾病的檢測基因表達研究	識別給定樣品中的蛋白質(zhì)數(shù)量檢測血清中病毒或細菌存在檢測有缺陷的蛋白質(zhì) 用作某些疾病診斷的明確措施
檢測系統(tǒng)	放射自顯影、光檢測和顏色變化	放射自顯影、光檢測和顏色變化	檢測光線和顏色變化

二、印跡膜特性

1、印跡膜作為印跡技術(shù)中的重要固相支持物的主要特性

名稱	特點
NC 印跡膜	無支撐布不添加洗滌劑 100% 純硝化纖維高蛋白結(jié)合能力毛細管率與厚度一致背淺
PVDF 印跡膜	耐化學性無變色非易燃高強度疏水性背景淺高蛋白結(jié)合
尼龍印跡膜	親水性高強度高化學耐受性高蛋白結(jié)合力

2、NC印跡膜、尼龍印跡膜和PVDF印跡膜的區(qū)別

	正電尼龍印跡膜	硝酸纖維素印跡膜	PVDF印跡膜
DNA或RNA截留力	480-600ug/cm2	80-100ug/cm2	125-300ug/cm2
蛋白截留力	500ug/cm2	80-100ug/cm2	100-300ug/cm2
結(jié)構(gòu)強度	柔韌、耐化學試劑，可重復剝離	膜脆、易破碎，不可重復使用	強度高、耐高溫、可重復剝離
吸附力	電荷和疏水作用	疏水作用和電荷	疏水作用和電荷
是否需活化	無需活化	無需活化	需要活化
檢測方法	放射性標記探針酶抗體偶聯(lián)物（化學發(fā)光、顯色、化學熒光）	放射性標記探針直接染色，熒光酶抗體偶聯(lián)物（化學發(fā)光、顯色）	直接染色酶抗體偶聯(lián)物（化學發(fā)光、顯色）

三、印跡膜性能驗證

印跡膜對生物分子的最大吸附能力驗證
印跡膜轉(zhuǎn)印生物分子效果驗證
印跡膜轉(zhuǎn)印燒穿檢測驗證
轉(zhuǎn)印膜背景及靈敏度（最低檢測限度）驗證
轉(zhuǎn)印膜吸附生物分子作用力（疏水和電荷）驗證

四、邁博瑞印跡膜參數(shù)

名稱	濕潤性	靈敏度和分辨率	背景	機械強度	溶劑耐受性	水潤性	蛋白結(jié)合能力	適用染色方法	檢測方式
Nylon66印跡膜	親水性	高	較高	軟而結(jié)實	較差	緩沖溶液潤濕	>400μg/cm2	不能用陰離子染料	不能用陰離子染料，受限制
NC轉(zhuǎn)印膜	親水性	高	低	干的NC膜易脆	差	緩沖溶液潤濕，避免氣泡	80-110μg/cm2	膠體金、麗春紅、酰胺黑、印度墨汁	常規(guī)染色，可用放射性和非放射性檢測
PVDF轉(zhuǎn)印膜	疏水性	高	淺	機械強度高	好	100%的甲醇潤濕	125-200μg/cm2	膠體金、麗春紅、酰胺黑、印度墨汁、考馬斯亮蘭	常規(guī)染色，較于NC膜可用考馬斯亮藍染色，ECL檢測和快速免疫檢測

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